液滴芯片-等离子体质谱联用的单细胞分析方法研究巨噬细胞对硫柳汞的细胞行为
ID:3202 View Protection:PRIVATE Updated Time:2023-04-12 22:53:20 Hits:1325 Poster Presentation

Start Time:2023-05-06 08:00(Asia/Shanghai)

Duration:0min

Session:SP 张贴报告专场 » SP-5-15、环境科学

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Abstract
硫柳汞(Thimerosal, THI)在部分疫苗制品、眼药水、抗毒血清、皮肤药品中被作为抗菌防腐剂使用。THI进入生物体中会发生分解,可能具有潜在的毒性。本工作建立了液滴芯片与电感耦合等离子体质谱(Inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)在线联用的单细胞分析方法,从单细胞水平上研究了THP-1巨噬细胞对THI的细胞行为。首先采用液滴芯片-ICP-MS在线分析方法对单个THI-1细胞中的Hg进行了定量分析,考察了THP-1细胞对THI摄取以及清除行为。结果表明不同浓度(50、100与200 ng/mL)THI暴露25 h后,细胞群体中一小部分细胞(<5%)胞内Hg含量很高(>200 fg/cell),而大部分细胞对Hg的吸收量较低,对于50、100与200 ng/mL的暴露组,分别有85.8%、88.2%与68.8%的细胞其胞内Hg含量低于20 fg/cell。停止暴露后,将细胞置于新鲜培养基中,考察了细胞对Hg的清除行为。实验结果表明,细胞对Hg的清除过程先快后慢。25 h之后,仍有部分细胞中的Hg可以被检测到(对于50、100与200 ng/mL的暴露组,分别有7.4、19.1和26.3%的细胞其胞内Hg含量高于2 fg/cell),表明细胞对THI不能做到完全清除。此外,通过检测细胞谷胱甘肽(GSH)与活性氧(ROS)水平,考察了THI的细胞毒性。发现暴露于THI期间,即使是低浓度THI暴露组(50 ng/mL)也能引起细胞的氧化应激行为,导致ROS水平上升,GSH水平下降,这种影响在停止THI暴露后一段时间内仍会持续。随着细胞对Hg的清除时间的延长,细胞的氧化还原平衡趋于恢复稳定,但无法恢复到正常水平,表明THI能对细胞表现出长期慢性毒性。
 
Keywords
液滴芯片,等离子体质谱,单细胞分析
Speaker
马骏戎
武汉大学

Submission Author
胡斌 武汉大学
陈贝贝 武汉大学
何蔓 武汉大学
马骏戎 武汉大学
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  • May 25 2023

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